Статьи Лабораторная диагностика
|
|
|
|
Определение уровня холестерина и триглицеридов
Подготовка пациента. Концентрация холестерина и триглицеридов в крови зависит от диеты, курения, приема алкоголя, интеркуррентных инфекций и даже от изменения положения тела (из-за увеличения объема плазмы при переходе от вертикального положения тела в горизонтальное показатели содержания липидов у лежачего больного могут оказываться заниженными на 5 - 10%; гораздо меньшие изменения возникают, когда больной принимает положение сидя именно в этом положении рекомендуется производить пункцию вены), поэтому важно забирать кровь в стандартных условиях, минимизирующих влияние этих факторов.
•2-3 недели до исследования пациент не должен нарушать нормальную диету.
•Тот факт, что после еды происходит временное значительное повышение уровня триглицеридов в крови, затрудняет интерпретацию анализа. Поэтому концентрацию триглицеридов следует определять только натощак (после 12-14-часового ночного голодания). Это условие необязательно соблюдать, если необходимо определить только уровень холестерина.
•Если пациент перенес тяжелое заболевание (например, инфаркт миокарда) или обширную операцию, то выполнение теста переносят на 3 месяца, за исключением случаев, когда кровь удалось взять в течение 12 часового периода. На 2-3 недели откладывают тестирование после заболевания средней степени тяжести.
•Пациент должен быть отдохнувшим и посидеть 5-10 минут до взятия крови.
•Наложение жгута более чем на 1 минуту перед взятием крови может привести к искажению результатов (при длительной венозной окклюзии также может измениться содержание жидкости в сосуде, что дает резко завышенные результаты определения уровня липидов). Если это возможно, лучше избегать наложения жгута.
•Невозможно получить достоверные результаты, если пациенту до взятия крови на анализ вливали растворы, содержащие липиды.
Обработка образцов. Необходимо взять примерно 5 мл крови. Для анализа можно использовать как плазму, так и сыворотку крови. Если в больнице предпочитают анализировать сыворотку (показатели содержания липидов в плазме примерно на 3% ниже, чем в пробах сыворотки, одновременно полученных у одного и того же человека), то кровь следует забирать в обычные химические пробирки без антикоагулянта. Если же принято определять липиды в плазме, то кровь собирают в пробирки, содержащие антикоагулянт (ЭДТА или гепарин), который предотвращает ее свертывание.
Ориентировочную информацию об уровне липидов можно получить уже по внешнему виду сыворотки или плазмы. Если плазма опалесцирует, то это обычно говорит о повышенном содержании в ней триглицеридов, и она перестает быть прозрачной, если концентрация триглицеридов значительно превышает нормальные значения. Появление пленки на поверхности плазмы или сыворот¬ки после нескольких часов стояния в холодильнике указывает на хиломикронемию. При высоком содержании ЛПНП плазма может приобретать оран¬жевый оттенок, оставаясь прозрачной.
Работа в лаборатории. Холестерин и триглицериды можно определять как химическими, так и ферментативными методами. Химические методы считаются более точными, но они очень трудоемкие, и поэтому в настоящее время применяются, главным образом, для тестирования стандартных сывороток. Фер¬ментативные методы проще химических, но и они состоят из нескольких этапов и требуют постоянного контроля стандартными сыворотками.
В последние годы были разработаны аппараты для быстрого определения уровня холестерина в крови, основанные на методах «сухой химии». Эти методы несколько уступают по точности ферментативным, но, вероятно, они будут наиболее удобны при массовых профилактических обследованиях. Независимо от того, какой метод использует данная лаборатория, коэффициенты вариабельности при проведении анализов не должны првышать 5% согласно рекомендациям Американской национальной программы по изучению холестерина. Это касается как отклонений от стандартных сывороток, так и колебаний значений при исследовании одного и того же образца. К сожалению, в наших лабораториях это правило иногда нарушается из-за отсутствия стандартов и стремления к экономии реактивов. В итоге результаты могут оказаться недостоверными.
При необходимости определения типа гиперлипидемии в большинстве случаев бывает достаточно, помимо определения уровня общего холестерина (ОХС) и триглицеридов (ТГ), определить холестерин ЛПВП. Делают три измерения: определяют уровень общего холестерина (то есть холестерина, входящего в состав ЛПНП и ЛПВП), холестерина ЛПВП и концентрацию триглицеридов (входящих в состав ЛПНП, ЛПОНП и ЛПВП). Уровень холестерина ЛПНП технически трудно измерить, поэтому в большинстве лабораторий его рассчитывают, используя результаты анализов, по следующему уравнению:
ХС ЛПНП = ТГ натощак – (ХС ЛПВП – ТГ/5)
где ХС – холестерин; ТГ – триглицериды.
интерпретация
Нормы: ТГ натощак – 0,45 – 1,80 ммоль/л.
Общий холестерин, ХС ЛПВП, ХС ЛПНП. В отличие от других тестов концепция нормы не вполне применима для определения уровня холестерина. Это объясняется включением в базу данных для определения референтных значений показателя результатов анализов практически здоровых людей, имеющих, однако, повышенный риск развития ИБС. Другими словами, «нормальный» уровень холестерина в крови нельзя отождествлять со «здоровым». Для оценки результатов скорее подходит концепция целевых, а не референтных значений.
Целевые значения таковы:
•общий холестерин в сыворотке < 5,2 ммоль/л;
•холестерин ЛПНП в сыворотке < 3,5 ммоль/л;
•холестерин ЛПВП в сыворотке > 1,1 ммоль/л.
Термины, используемые для интерпретации результатов:
•гиперлипидемия: повышенная концентрация липидов в крови (ХС > 5,2 ммоль/л; ТГ > 1,8 ммоль/л);
•гиперхолестеринемия: повышенная концентрация общего холестерина (> 5,2 ммоль/л);
•триглицеридемия: повышенная концентрация триглицеридов (> 1,8 ммоль/л).
Только в редких случаях для уточнения диагноза на практике приходится прибегать к электрофорезу или ультрацентрифугированию, например, при очень высоких или низких значениях. Общего ХС и ТГ. Кроме того, один из этих методов используют в том случае, если подозревается III тип гиперлипидемии и необходимо доказать наличие остатков хиломикронов (полосы).
Содержание в плазме различных липопротеинов можно также определять иммунологически по соответствующим аполипопротеинам, однако данный метод применяется, главным образом, в научных лабораториях.
Определение числа ЛПНП-рецепторов на поверхности клеток при обследовании больных с семейной гиперхолестеринемией пока еще не является рутинным методом и используется, главным образом, в научных целях. На практике этот метод незаменим для внутриутробной диагностики гомозиготной формы семейной гиперхолестеринемии.