Статьи Лабораторная диагностика
|
|
|
|
Лабораторная диагностика инфекции, вызванной вирусом Эпштейн-Барр
… по данным различных авторов, в настоящее время до 80-90% населения земного шара инфицировано вирусом Эпштейн-Барр (Тимченко В.Н. и др, 2006). Эпидемиологическое значение вируса Эпштейн-Барр определяется широкой циркуляцией вируса среди населения. В мире ежегодно заражаются от 16 до 800, а в России 40-80 человек на 100 000 населения (Перадзе Х.Д., 2001).… вирус Эпштейн-Барр - лимфотропный вирус человека, особенностью которого является способность вызывать не гибель клеток, в которых происходит его репродукция, а, напротив, их патологическую пролиферацию. Вирус Эпштейн-Барр является представителем онкогенных ДНК-содержащих вирусов.
Вирус Эпштейн-Барр относится к группе вирусов герпеса (так называемая подгруппа G). Все герпесвирусы имеют цикл внутриклеточного паразитирования в ядре и цитоплазме пораженной клетке, при этом в ядре накапливаются включения вирусных частиц, что увеличивает размеры как самого ядра, так и клетки в целом (патогенез возникновения гигантских клеток). У человека герпесвирусы могут вызывать самые различные заболевания*.
Уникальным биологическим свойством всех герпесвирусов человека являются (1) тканевой тропизм, (2) способность к персистенции (способность непрерывно или циклично размножаться, то есть реплицироваться, в инфицированных клетках тропных тканей, что создает постоянную угрозу развития инфекционного процесса) и (3) латенции (герпесвирусы сохраняются в нервных ганглиях в течение всей жизни человека).
Вирус Эпштейн-Барр селится в основном в эпителиальных клетках носоглотки и пищеварительного тракта, а также в В-лимфоцитах.
*Заболевания человека вызываемые герпесвирусами (G-герпесвирусы обладают тропизмом к В- и Т-лимфоцитам, где длительно персистируют):
• Вирус Эпштейн-Барр (вирус герпеса человека 4 типа, ВЭБ, EBV) – инфекционный мононуклеоз, лимфома Беркитта, назофарингеальная карцинома, волосатая лейкоплакия, В-клеточная лимфопролиферация.
• Вирус герпеса человека 6 типа (ВГЧ-6) – В-клеточная лимфома, эритема новорожденных, внезапная экзантема, системные болезни после трансплантации.
• Вирус герпеса человека 7 типа (ВГЧ-7) – эритема новорожденных, синдром хронической усталости.
• Вирус герпеса человека 8 типа (ВГЧ-8) – саркома Капоши у ВИЧ-серонегативных людей; саркома Капоши, ассоциированная с ВИЧ-инфекцией и СПИДом.
Заболевания, обусловленные вирусом Эпштейн-Барр, относятся к СПИД-индикаторным патологиям*. Показана этиологическая роль вируса Эпштейн-Барр при волосатой лейкоплакии – характерного для СПИДа поражения слизистой оболочки полости рта. Имеются данные о роли вируса Эпштейн-Барр в возникновении энцефалопатии при ВИЧ-инфекции, а также в возникновении ювенильного ревматоидного артрита: вирус Эпштейн-Барр содержит полипептид, присоединяющийся к DR4 и DR1 и вызывающий заболевание. Иногда вирус Эпштейн-Барр вызывает гепатит.
*СПИД - индикаторные болезни
Первая группа — это те заболевания, которые присущи только тяжелому иммунодефициту (уровень CD4-лимфоцитов ниже 200/мкл), поэтому они позволяют поставить клинический диагноз даже при отсутствии в крови антител к ВИЧ или ВИЧ-антигенов. К таким болезням относятся: кандидоз пищевода, трахеи, бронхов; внелегочный криптококкоз; криптоспоридиоз с диареей более 1 мес.; цитомегаловирусные поражения различных органов, помимо печени, селезенки или лимфоузлов у больного старше 1 мес.; инфекция, обусловленная вирусом простого герпеса, проявляющаяся язвами на коже и слизистых оболочках, которые персистируют более 1 месяца, а также бронхитом, пневмонией или эзофагитом любой продолжительности, поражающим больного в возрасте старше 1 месяца; генерализованная саркома Капоши у больных моложе 60 лет; лимфома головного мозга (первичная) у больных моложе 60 лет; лимфоцитарная интерстициальная пневмония и/или легочная лимфоидная гиперплазия (ЛИП/ЛЛГ комплекс) у детей в возрасте до 12 лет; диссеминированная инфекция, вызванная атипичными микобактериями (микобактерии комплекса М. avium intracellulare) с внелегочной локализацией или локализацией (дополнительно к легким) в коже, шейных лимфатических узлах, лимфатических узлах корней легких; пневмоцистная пневмония; прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия; токсоплазмоз головного мозга у больного старше 1 месяца.
Вторая группа — это заболевания, которые могут развиваться как на фоне тяжелого иммунодефицита, так и без него. В этих случаях необходимо лабораторное подтверждение диагноза. К заболеваниям второй группы относятся: бактериальные инфекции, сочетанные или рецидивирующие у детей до 13 лет (более двух случаев за года наблюдения): септицемия, пневмония, менингит, поражения костей или суставов, абсцессы, обусловленные; гемофильными палочками, стрептококками; кокцидиоидомикоз диссеминированный (внелегочная локализация); ВИЧ-энцефалопатия («ВИЧ-деменция», «СПИД-деменция»); гистоплазмоз, диссеминированный с внелегочной локализацией; изоспороз с диареей, персистирующей более 1 мес.; саркома Капоши у людей любого возраста; лимфома головного мозга (первичная) у лиц любого возраста; другие В-клеточные лимфомы (за исключением болезни Ходжкина) или лимфомы неизвестного иммунофенотипа (мелкоклеточные лимфомы типа лимфомы Беркитта и др., иммунобластные саркомы; атипичный микобактериоз диссеминированный с поражением, помимо легких, кожи, шейных или прикорневых лимфоузлов; туберкулез внелегочный (с поражением внутренних органов, помимо легких); сальмонеллезная септицемия рецидивирующая; ВИЧ-дистрофия (истощение, резкое похудание).
Пути передачи вируса Эпштейн-Барр: (1) со слюной, например, при поцелуях; (2) при переливании крови; (3) половым путем.
Распространение вируса через предметы обихода или воздушно-капельным путем маловероятно, но в некоторых руководствах указывается на то, что инфекция все же может передаваться воздушно-капельным путем.
Точных данных о частоте встречаемости ВЭБ-инфекции нет. После первичного инфицирования вирус Эпштейн-Барр остается в организме !!! пожизненно. 15-25% здоровых ВЭБ-позитивных взрослых выделяют вирус из ротоглотки. В регионах с повышенной частотой инфекционного мононуклеоза отмечается и более высокая частота некоторых форм злокачественных опухолей – как раз тех, что предположительно возникают при непосредственном участии вируса Эпштейн-Барр. !!! Около 2% детей инфицируется вирусом Эпштейн-Барр во время беременности, и почти 10% - во время родов.
В юношеском возрасте ВЭБ-инфекция может протекать в форме инфекционного мононуклеоза, характерными клиническими признаками которого являются боль в горле, лихорадка, спленомегалия, гепатомегалия и аденопатия. Студенты и военнослужащие являются группами повышенного риска развития инфекционного мононуклеоза.
Транзиторные иммунодефицитные состояния, характерные для больных, перенесших операции по трансплантации органов, больных злокачественными новообразованиями, беременных женщин и лиц преклонного возраста, могут приводить к развитию латентной инфекции. Персистирование ВЭБ-инфекции является этиологическим фактором клинического синдрома, получившего название «хроническая ВЭБ-инфекция» или «хронический мононуклеоз».
Наиболее часто уточнение этиологии заболевания лабораторным методом ПЦР-анализа требуется при поражении органа зрения (увеит, коньюктивит и кератоконьюктиит), центральной нервной системы (серозный энцефалит и менингит) и половых органов (наружные половые органы, цервицит, уретрит), так как не только герпесвирусы, но и довольно большое число других вирусов вызывают острые и рецидивирующие заболевания этих органов. В подобных случаях ошибка в выборе этиопатогенетических препаратов и их доз зачастую приводит к необратимым последствиям. Лабораторный контроль за течением герпесвирусных заболеваний обычно необходим при диссеминации процесса, у беременных женщин и больных с иммунодефицитом различного происхождения.
Учитывая, что вирус Эпштейн-Барр может выделяться в каком-то проценте случаев у здоровых людей, после качественного анализа !!! необходимо провести определение наличия иммуноглобулинов в крови (по иммуноглобулинам G и M), чтобы определить стадию инфекционного процесса. Наиболее специфичными и чувствительными маркерами острой инфекции являются IgG к раннему антигену (ЕА) и IgM к капсидному комплексу (VCA, или АВК - антиген вирусной капсулы), а маркерами паст-инфекции* – IgG к EBNA-1 (ядерный антиген). Экспрессия EBNA-1 антигена (ядерного) происходит через 12 – 24 часа после заражения, одновременно или после экспрессии мембранного антигена вируса. Обследование выполненное на первой недели, у 10-15% больных дает отрицательный результат. IgM-антитела к антигену вирусной капсулы (АВК) диагностически значимы при первичной ВЭБ-инфекции. Ig-анти-АВК антитела обнаруживаются на ранних этапах инфекционного процесса и сохраняются на всю жизнь. Антитела к ядерному антигену EBNA появляются примерно на 6-8-й неделе и также сохраняются в течение всей жизни. Наличие IgМ-анти-АВК антител и сероконверсия титра антител к ядерному антигену EBNA диагностически значимы при первичной ВЭБ-инфекции.
*Паст-инфекция - появление иммуноглобулинов клacca G к нуклеарному антигену (ЕВNА-1), т.е. маркера давно перенесенной инфекции вирусом Эпштейн-Барр.
Интерпретация серологических данных:
• инкубационный период или отсутствие инфицирования: VCA-IgM (ABK IgM) (-); EA-IgG (-);
• очень ранняя первичная инфекция: VCA-IgM (ABK IgM) (+); EA-IgG (-);
• ранняя первичная инфекция: VCA-IgM (ABK IgM) (+); EA-IgG (+);
• поздняя первичная инфекция: VCA-IgM (ABK IgM) (+/-); EA-IgG (+);
• атипичная первичная инфекция: VCA-IgM (ABK IgM) (+); EA-IgG (-);
• хроническая инфекция: VCA-IgM (ABK IgM) (-/+); EA-IgG (+);
• ранняя паст-инфекция: VCA-IgM (ABK IgM) (-); EA-IgG (+);
• поздняя паст-инфекция: VCA-IgM (ABK IgM) (-); EA-IgG (-);
• реактивация: VCA-IgM (ABK IgM) (+); EA-IgG (+);
• атипичная реактивация: VCA-IgM (ABK IgM) (+); EA-IgG (-);