Статьи Лабораторная диагностика
|
|
|
|
Основные принципы оценки результатов при иммунологических методах исследования
… антитела иммунологической защиты макроорганизма от инфекционных агентов у человека представлены четырьмя классами иммуноглобулинов: IgA, IgG, IgM, IgE.Иммуноферментный анализ (ИФА) основан на высокой специфичности и избирательности иммунологических реакций «антиген-антитело».
Аналитической мишенью для антител тест-систем могут быть:
1. иммуноглобулины A, M, G, E;
2. гормоны белковой и стероидной природы;
3. транспортные и структурные белки, липопротеиды, гликопротеиды, и другие высокомолекулярные биологические соединения.
ИФА позволяет определить в сыворотки крови специфические иммуноглобулины (IgA, IgG, IgM), вырабатываемые в организме в ответ на внедрение инфекционного агента. Следует отметить, что каждый вид специфичных иммуноглобулинов появляется на разных стадиях иммунного ответа.
Главное правило, которым следует руководствоваться: заболеванием считаются появление IgM (для хламидий IgA) или IgG (если его до сих пор не было), или увеличение IgG в 2-4 раза при контрольных исследованиях через 2-3 недели.
После проведенной терапии IgG могут определяться на низком уровне в течение многих лет.
IgM-антитела (ранние иммуноглобулины) в сыворотке пациентов являются ранним маркером инфекции, появляются первыми при иммунологическом ответе макрорганизма. Эти антитела присутствуют только при острой фазе заболевания и не определяются при реинфекции. Их отсутствие не исключает наличия протекающей хронической инфекции. Методами ИФА они выявляются со 2 недели от начала заболевания (обострения) по 5-6 неделю, после чего IgM исчезают из кровотока, так как плазматические клетки переходят на продукцию IgG и IgA.
IgA-антитела (секреторные иммуноглобулины) появляются через 10-14 дней после начала заболевания, обычно параллельно появлению IgG-антител, только на более низком уровне титров и свидетельствуют о прогрессивном заболевании. Наличие IgA в крови, даже когда не удается обнаружить возбудителя ПЦР и культуральным методом, должно расцениваться как проявление активно протекающего инфекционного процесса. IgA начинают вырабатываться через 2-4 недели от момента инфицирования. 20% от общего пула IgA циркулируют в крови, а 80% находится в составе секрета слизистых оболочек, где и реализуют свою защитную функцию. Диагностическую ценность IgA придает тесная зависимость их продукции от раздражения иммунной системы антигеном возбудителя. Так, через 2 недели после эрадикации инфекта IgA исчезают из кровотока, что является ценным критерием излеченности заболевания.
IgG-антитела (поздние, наиболее специфические иммуноглобулины) определяются обычно через 15-20 дней после начала заболевания. Их наличие отражает более общую картину позитивного иммунного ответа в случаях текущей, хронической или перенесенной инфекции. IgG – главный инструмент иммунной системы по контролю над инфекциями. Методами ИФА IgG выявляется с 2-5 недель от начала заболевания (обострения) и исчезают из кровотока через несколько месяцев после эрадикации возбудителей. Именно IgG определяют стерильный иммунитет - поствакцинальный или постинфекционный пожизненный (оспа, краснуха, паротит и др.).
Для IgM, IgG, IgA существует пороговый диагностический титр (норма), зависящий от уровня иммунного ответа макроорганизма на конкретный инфекционный агент, от типа используемой тест-системы, от территориальной и этнической принадлежности обследуемой группы населения и многих других факторов. Поэтому каждая лаборатория должна выработать и указывать свои нормы, наиболее точно учитывающие вышеуказанные требования. Пороговые титры (нормы) обычно имеют значения в пределах от 1:10 до 1:800. Однако не следует пренебрегать и обнаружением следовых антител (< нормы), что может быть показателем либо стадии иммунологического ответа, либо иммунодепрессии. В таком случае рекомендуется переопределение антител через некоторый временной интервал (2-3-4 недели).
Необходимо учитывать следующие обстоятельства:
• наличие клинической картины заболевания (при этом даже двукратное увеличение IgG может быть клинически значимо);
• анамнез – время возникновения жалоб (IgM и IgA появляются только на определенной стадии инфекционного процесса); наличие сопутствующих заболеваний, так, например, у всех женщин, страдающих эндометриозом, выявлено повышение титра антител к персистирующим вирусам (цитомегаловирус и др.); некоторые лекарственные средства могут приводить к увеличению титров IgG, например, если применяются гормональные контрацептивы.
Важным при оценке диагностической значимости титров иммуноглобулинов является прохождение курса специфического лечения, наличие воспалительных заболеваний у партнера, так как при заболевании одного партнера у второго заболевание может протекать в стертой, абортивной форме. Если есть сомнения в наличии воспалительного процесса, можно прибегнуть к лабораторной диагностике других факторов воспаления, например: определение уровня С-реактивного белка.
С-реактивный белок – белок острой фазы воспаления, относящийся к бета-глобулинам. С-реактивный белок, как и другие белки острой фазы воспаления, появляется в сыворотке вскоре после повреждения тканей и начала воспаления. Повышение уровня С-реактивного белка наблюдается пи острых бактериальных и вирусных инфекциях. инфаркте миокарда, злокачественных новообразованиях и аутоиммунных заболеваниях. Уровень С-реактивного белка свидетельствует о тяесте и остроте состояния, а также о прогнозе заболевания. В отличие от широко использующегося теста определения скорости оседания эритроцитов как неспецифического показателя остроты процесса, С-реактивный белок является более лабильным и, следовательно, более удобным показателеим для клинического мониторинга. Кроме того, уровень С-реактивного белка, в отличие от скрости оседания эритроцитов не ависит от пола, времени суток, количества и морфологии эритроцитов, белкового состава плазмы. Количественное определение С-реактивного белка хорошо поддается автоматизации и стандартизации.
IgE выполняют ключевую роль в инициации аллергических реакций I типа. анафилактических. Иммунный комплекс, состоящий из экзогенного аллергена и IgE, фиксируется Fc-рецепторами тучных клеток, что является сигналом для их дегрануляции. Массивное выделение тучными клетками гистамина, простогландинов, лейкотриенов, протеаз приводит к анафилактической реакции, лежащей в основе атопической бронхиальной астмы и атопического дерматита. IgE используется для оценки иммунного статуса человека. Высокий уровень IgE сыворотки крови свидетельствует о чрезмерной активации гуморального звена иммунитета, дающего неспецифическую защиту организму, на фоне дефектного функционирования клеточного звена, обеспечивающего организму специфическую защиту, полноценный контроль за гомеостазом и подавление аномальной активации гуморального звена. Нормальный уровень IgE зависит от возраста.
Возраст - IgE (кЕ/л):
• новорожденные - 1,5;
• 1 год – 15;
• 5 лет – 60;
• 6 -9 лет – 90;
• 10 - 15 лет – 200;
• взрослые – 100.