Оглавление

Статьи Фармакология
Статьи Фармакология

Ботулотоксин А и лекарственные препараты на его основе

одним из принципиально новых направлений среди терапевтических методов является использование препаратов ботулинического токсина типа А.



Введение. Нейротоксины, продуцируемые грамположительными анаэробными бактериями Clostridium botulinum, являются наиболее сильными токсинами из известных человечеству. Различают 7 ботулинных токсинов (ВТХ): BTX-A, B, C, D, E, F и G. Нервная система человека чувствительна только к пяти из них: BTX-A, В, Е, F и G и нечувствительна к двум - BTX-C и BTX-D. Давно известно, что прием обсемененной токсинами и бактериями C. botulinum пищи (как правило, прием консервированных продуктов) может привести к ботулизму, нередко заканчивающемуся летальным исходом. В медицинских целях используются только высокоочищенный ботулотоксин А (ВТХ-А) с большим разведением, которые вызывают временный паралич поперечнополосатой мускулатуры в области введения и не приводят к летальному исходу.

Показаниями к применению препаратов, содержащих ботулотоксина А являются: блефароспазм, спастическая кривошея, дисфонии, тики, нистагм, лицевой гемиспазм, спастичность, уменьшение тремора, лечение ладонного, подошвенного и аксиллярного гипергидроза и др., а также (в косметологии) лечение гиперфункциональных морщин в области лба (лицевые складки экспрессии) и подкожной мышцы шеи.

Эффект BTX-A объясняется ингибированием высвобождения ацетилхолина из пресинаптического нейрона нервно-мышечного соединения. В пределах синапса белковые изоформы образуют сложную платформу, необходимую для накопления и высвобождения ацетилхолиновых везикул через клеточную мембрану. Такие белковые изоформы представлены везикулоассоциированными мембранными протеинами, известными также как синаптобревин; синаптически-ассоциированными белками и синтаксинами. Находясь внутри цитоплазмы клетки, ВТХ нарушает функцию белков, необходимых для высвобождения ацетилхолина. Этот механизм реализуется в три этапа: (1) на первом этапе происходит присоединение ВТХ-А к пресинаптическому холинергическому рецептору - белку синаптотагмину, способному связать ВТХ-А; (2) на втором этапе ВТХ-А вовлекается в биохимические процессы в клетке через рецептор-опосредованный эндоцитоз; тяжелая цепь ВТХ-А связывается с образовавшимся ионным каналом, а его легкая цепь переходит из эндосомы в цитоплазму нейрона; (3) третий этап - нейромышечная блокада. In vitro связывание ВТХ с нейроном происходит в течение 32-64 мин. За это время из места введения действие токсина может распространиться на соседние участки.

Доза BTX-A, необходимая для клинического эффекта, чрезвычайно мала - 1 мышиная единица (МЕ), что составляет всего 3 х 107 молекул. Чем большая доза токсина будет введена, тем быстрее наступит эффект паралича, в некоторых случаях он проявляется уже через 6 ч после введения ВТХ-А. В малых дозах препарат сразу либо не действует, либо эффект проявляется только через 1-2 недель. При введении средних доз ВТХ-А первые проявления клинического действия наблюдаются через 24-72 ч, а его максимальный эффект - только через 2 недели после инъекции. Поэтому используемый токсин должен быть очень специфичным и активным и не вызывать побочные эффекты.

BTX-A обладает иммуногенной активностью. Являясь по сути анатоксином, он приводит к выработке антител как у людей, по роду профессии имеющих дело с этим токсином, так и у животных, предназначенных для производства сыворотки, содержащей антитела к токсину. У пациентов, имеющих антитела к ботулотоксину, введение токсина не вызывает никакой реакции. Главным образом, это относится к больным с неврологической симптоматикой, проходящих лечение ВТХ-А в дозах от 100 до 200 МЕ на курс или больше. У 10-20% таких пациентов через разное время развиваются антитела к BTX-A. Поэтому в настоящее время в качестве альтернативы ВТХ-А в клинике исследуются новые токсины ВТХ-А и BTX-F, у которых не отмечается перекрестной реактивности.

Токсичность. Молекула BTX-A является чрезвычайно активной, но в низких разведениях, необходимых для клинического использования, она является нестабильной. Определение биологической активности и токсичности у мышей является стандартной процедурой при производстве BTX-A. Подготовленный соответствующим образом препарат вводят мышам интраперитонеально и затем оценивают присутствие специфического BTX нейротоксина в образце. В качестве биологической модели используются самки мышей, массой 18 - 22 г породы Свисс-Вебстер. Одна единица Ботокса соответствует примерно 3 единицам Диспорта.

Препараты ВТХ-А. В России к клиническому применению разрешены четыре препарата ВТХ-А: Ботокс (Botox ®, «Allergan Inc», Irvine, США) и Диспорт (Dysport®, Ipsen Biopharm Ltd. Великобритания), Ксеомин (Xeomin, Impfstoffwerk Dessau-Tornau GmbH, Германия, упаковано Impfstoffwerk Dessau-Tornau GmbH, Германия) и Лантокс (Lantox; Lanzhou Institute of Biological Products, Китай) .

В стерильном флаконе Ботокса содержится 100 МЕ токсина ботулина типа А, 0,5 мг человеческого альбумина и 0,9 мг NaCl. Ботокс необходимо хранить в холодильнике при температуре от 2 до 4 оС. Дата истечения срока применения указывается в инструкции к препарату. Она обычно составляет месяц или немного больше. По инструкции FDA, открытый флакон должен быть использован в течение 4 ч, так как хранение может повлиять на биологические эффекты ВТХ-А. В ряде работ этот вопрос исследовался достаточно подробно. Так, M. Garland и H. Hoffman (1993) показали, что приготовленный раствор Ботокса не терял биоактивность в течение 6 ч при комнатной температуре, тем не менее через 12 ч его активность снижалась на 44%. Повторное замораживание ботокса после разведения в физиологическом растворе и хранении в течение 1 или 2 недель приводило к снижению биоактивности на 70%. Несмотря на то что пока не существует стандартных рекомендаций по хранению Ботокса, большинство клиницистов не замораживают его более чем на 1 неделю. Оптимальным считается замораживание на срок менее 24 ч. Диспорт отличается от Ботокса химической и биологической активностью, так как готовится по другой технологии. Поэтому его дозы, необходимые для эквивалентного клинического эффекта, в 3-4 раза больше, чем у Ботокса. К тому же Диспорт обеспечивает более сильную блокаду, придает большую неподвижность, что желательно при гипертрофированных мышцах, но в то же время создает больший риск побочных эффектов. В одном флаконе Диспорта содержится 500 МЕ токсина (и вспомогательные вещества: альбумин человека - 125 мкг; лактоза - 2,5 мг). Кроме того, в отличие от Ботокса он может храниться при комнатной температуре. Препарат Ксеомин (лиофилизат для приготовления раствора для внутримышечного введения1 фл.) содержит: ботулинический токсин типа А 100 ЕД, сахарозу - 4,7 мг и сывороточный альбумин 1 мг человека. Препарат Ксеомин, так же как и Диспорт, может храниться при комнатной температуре - не выше 25 °C. Препарат Лантокс разрабатывался в университете штата Висконсин, где в свое время велась работа над Ботоксом, профессором Суджиямой и доктором Ванг. В феврале 1997 минздрав КНР выдал официальное разрешение на производство Лантокса. В том же году препарат получил сертификат на свободную продажу в Китае (лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 50, 100 ЕД, во флаконах). На сегодняшний день Лантокс является единственным препаратом ботулотоксина в Китае. В Лантоксе в качестве стабилизатора используется желатин, а в Ботоксе, Диспорте и Ксеомине (как было указано ранее) - человеческий белок альбумин, который может вызывать аллергические реакции. Желатин, в свою очередь, широко используется в медицине для производства лекарственных капсул, искусственной плазмы, «биологического клея» для операций в микрохиругии, и является более нейтральным к тканям человеческого организма. В этом заключается одно из преимуществ препарата Лантокс перед остальными препаратами ботулотоксина.

(!) Инъекции лекарственного препарата, содержащего ботулотоксина, должен проводить квалифицированный врач, имеющий специальную подготовку и разрешение от фирмы-производителя. Инъекции можно проводить амбулаторно в условиях процедурного кабинета.



Статьи Фармакология

LUXDETERMINATION 2010-2013