Статьи Судебная медицина
|
|
|
|
Судебно-медицинское исследование крови
Экспертиза пятен кровиСледы крови играют важную роль в следственной практике, поскольку они часто являются следами происшествия или совершенного преступления.
Вопросы, разрешаемые при экспертизе следов крови, определяются как обстоятельствами дела, так и экспертными возможностями. Поэтому в каждом уголовном деле между следователем, назначившим судебно-биологическую экспертизу, и экспертом-биологом необходимо наладить деловой контакт и взаимопонимание, поскольку целесообразно, чтобы они совместно отобрали вещественные доказательства на экспертизу, определили экспертные возможности по каждой конкретной экспертизе с учетом имеющихся в распоряжении следствия доказательств, согласовали точные формулировки вопросов, ставящихся перед экспертом.
Установление наличия следов крови. При расследовании уголовных дел большое значение имеет установление присутствия следов крови на самых различных предметах.
Выявление крови на вещественных доказательствах — первый обязательный этап любой судебно-медицинской экспертизы крови. Причем, только доказав наличие следов крови, эксперт может приступить к решению других вопросов, поставленных перед ним следователем. Если же эксперт не смог доказать присутствие следов крови на том или ином предмете, он должен отказаться от решения других стоящих перед ним вопросов. Поэтому эксперт должен четко, а главное обоснованно решать вопрос о наличии или отсутствии крови в исследуемом пятне, на том или ином предмете (объекте).
В качестве предварительной пробы на наличие следов крови применяют метод исследования в ультрафиолетовых лучах. При таком исследовании пятна крови имеют темно-коричневый цвет и бархатистый вид. При старении пятен крови содержащийся в ней гемоглобин под действием различных внешних факторов может перейти в особый пигмент — гематопорфирин, который дает в ультрафиолетовых лучах яркое оранжево-красное свечение. Исследование в ультрафиолетовых лучах помогает иногда обнаружить подозрительные пятна на участках, подвергшихся замыванию.
В судебной медицине широко распространен метод абсорбционной спектроскопии (микроспектральный, основанный на способности гемоглобина и его производных — гемохромоген, гематопорфирин — поглощать световые волны определенной длины и образовывать спектры поглощения). Обнаружение спектра гемоглобина или одного из его производных доказывает наличие крови в исследуемом пятне. Микроспектральный метод обнаружения крови очень чувствителен, он позволяет выявлять кровь в ничтожно малых, микроскопических количествах.
В последнее время разработаны новые способы диагностики наличия крови. К ним относятся хроматографические методы исследования (микрохроматография на бумаге, хроматография на силуфоловых пластинках), отличающиеся доступностью, высокой чувствительностью, возможностью одновременного исследования большого количества материала и сохранения хроматограмм в качестве вещественных документов результатов исследования, а также серологические методы определения гемоглобина в пятнах крови с помощью гетероиммунных антигемоглобиновых сывороток. Простым доказательным методом установления наличия крови является эпимикроскопия. При наличии на гладкой поверхности предмета едва заметного тонкого следа, похожего на кровь, его исследуют с помощью прибора опак-иллюминатора. В таком объекте путем непосредственной эпимикроскопии могут выявляться эритроциты, доказывающие кровяную природу следа.
Экспертная оценка различных методов установления наличия крови должна быть следующей. Ориентировочные пробы на наличие крови, если даже они и применялись, оцениваться не должны, поскольку они не являются строго специфичными для крови и носят вспомогательный характер Положительный результат любой примененной экспертом доказательной реакции свидетельствует о присутствии крови в исследованном объекте. При отрицательном — выводы об отсутствии крови в исследованном объекте не должны быть столь категоричны. Если были использованы все высокочувствительные методы установления наличия крови и получен отрицательный результат, то выводы об отсутствии крови в исследованном объекте должны строиться в зависимости от характера и состояния самого объекта. При достаточных размерах похожего на кровь пятна, а также при отсутствии загрязнения предмета-носителя выводы об отсутствии крови будут более категоричными, и, наоборот, при крайне малом количестве исследованного объекта и при сильном загрязнении материала — более осторожными.
Определение видовой принадлежности крови. После выявления на вещественных доказательствах следов крови необходимо определить видовую специфичность ее белков, т.е. установить, принадлежит ли кровь человеку или животному.
Проведение такого исследования, с одной стороны, может диктоваться обстоятельствами дела, когда в процессе расследования возникают версии о происхождении следов крови не только от человека, но и от животного, а с другой - потребностью дальнейшего установления группы крови для решения вопроса о возможности происхождения ее от определенного лица, что нельзя сделать без определения видовой принадлежности крови.
Во многих случаях одно только установление вида крови может сыграть значительную, если не решающую, роль в раскрытии преступления или обстоятельств происшествия. Это относится ко всем случаям браконьерства, незаконного убоя скота, авиационных происшествий (когда возникает версия о столкновении с птицей как причиной авиационной катастрофы). Кроме того, иногда подозреваемые в совершении преступления пытаются объяснить принадлежность обнаруженной на их одежде крови не человеку, а, например, какому-нибудь домашнему животному, птице и т.п. В этих случаях определение видовой принадлежности крови позволяет подтвердить или опровергнуть версию подозреваемого о происхождении следов крови на его одежде.
В судебно-медицинской практике для установления видовой принадлежности крови используют различные иммунологические методы, обладающие высокой чувствительностью и специфичностью. Они основаны на строго специфичном взаимодействии видовых антигенов и антител, проявляющемся реакцией преципитации. Живой организм в ответ на введение чужеродного белка (антигена) вырабатывает особые вещества — антитела, взаимодействующие только с белком данного вида. Таким образом, если какому-нибудь животному ввести в кровь белок (сыворотку крови) другого животного, то в его организме выработаются антитела, взаимодействующие с белком животного данного вида.
При взаимодействии иммунной антисыворотки, содержащей антитела на белок определенного вида животного, с белком крови того же животного происходит реакция между антигеном и антителом, проявляющаяся в выпадении осадка (преципитата). Располагая набором иммунных сывороток, преципитирующих белки человека и различных животных, эксперт может установить видовую принадлежность крови в исследуемом пятне путем контакта этих сывороток с вытяжками из пятна крови. Для нужд судебной медицины выпускаются сыворотки, преципитирующие белки человека и некоторых животных (рогатого скота, лошади, свиньи, птицы, кошки, собаки).
Реакция препицитации сама по себе не устанавливает наличия крови, а лишь определяет видовую специфичность ее белков, поэтому в каждом подозреваемом на кровь пятне сначала устанавливают ее присутствие, а потом определяют вид. Следует помнить, что белки живого организма, характеризующие его видовую специфичность, содержатся не только в крови, но и во всех тканях, органах и выделениях организма. Поэтому реакцией белковой преципитации можно установить видовую принадлежность не только пятен крови, но и пятен любых выделений. Этот факт важен для экспертной оценки результатов исследования, он еще раз свидетельствует об обязательности начального установления присутствия крови в исследуемом пятне. Если в таком пятне, лишь подозрительном на кровяное, имеются какие-нибудь выделения человека (например, пот, слюна, моча, выделения из носа и т.д.), то выявление в нем человеческого белка можно ошибочно трактовать присутствием крови, которой на самом деле нет. Дальнейшее выявление в подобном пятне групповых факторов, относящихся к выделениям человека, а не к его крови, может еще более усугубить ошибку эксперта.
Реакция преципитации чувствительна и позволяет открывать видоспецифичный белок в пятнах крови площадью в несколько квадратных миллиметров. Результат реакции зависит не только от размеров, интенсивности пятен крови и степени пропитывания ею материала предмета-носителя, но и от состояния белков крови, главным образом их растворимости. Следует помнить, что видоспецифичные белки крови крайне чувствительны к различным физическим и химическим воздействиям, поэтому для успешного определения вида крови в пятнах на вещественных доказательствах необходимо правильно их хранить и пересылать в лабораторию. Так, неправильная термическая обработка предметов со следами крови (сушка при высокой температуре) приводит к тому, что ее белки переходят в нерастворимое состояние, препятствующее установлению их вида, а пересылка влажной одежды со следами крови — к ее загниванию и денатурации белков.
Экспертная оценка результатов реакции преципитации должна быть следующей. Выпадение осадка (преципитата) в пробирке с вытяжкой из пятна крови и соответствующей преципитирующей сывороткой и отсутствие осадка в контрольной пробирке (с вытяжкой предмета-носителя) позволяет выявить определенный вид крови в исследуемом пятне.
Отсутствие осадка с вытяжкой из исследуемого пятна крови при использовании всех имеющихся сывороток может быть обусловлено различными причинами – кровью какого-либо другого вида животного, разрушением или нерастворимостью белков крови, недостаточным ее количеством. В таких случаях прибегают к концентрированию вытяжек и использованию более чувствительных методик установления видовой принадлежности крови. К ним можно отнести реакцию преципитации на специальной хроматографической фильтровальной бумаге, в узком стеклянном капилляре, а также метод электропреципитации (преципитация в араговом геле с использованием электрического тока).
В настоящее время с целью повышения чувствительности и разрешающей способности реакции преципитации в качестве регистратора образования преципитата применяют лазерный индикатор. Этот метод позволяет определять видовую принадлежность крови в смешанных и труднорастворимых пятнах, в следах крови на загрязненных предметах-носителях и т. п.
Определение групповой принадлежности крови. В крови человека содержатся многочисленные антигены эритроцитарных, сывороточных и ферментных систем, передающиеся по наследству, причем их различные сочетания в каждой системе характеризуют ту или иную группу крови. Особенности антигенного набора в различных системах крови человека позволяют решать вопрос о возможности или невозможности происхождения следов крови от конкретного лица.
Чем шире круг исследованных систем, тем выше возможность такого дифференцирования. Групповую принадлежность крови определяют не только в пятнах на вещественных доказательствах, но и в крови проходящих по делу лиц (потерпевших или подозреваемых). Полученные результаты сопоставляются, и в зависимости от них эксперт делает вывод о возможности происхождения следов крови от того или иного лица.
При судебно-медицинском исследовании трупа с повреждениями, сопровождающимися наружным кровотечением, определение групповой принадлежности трупной крови обязательно, поскольку в дальнейшем могут быть обнаружены следы крови на предметах, у лиц, подозреваемых в преступлении, на транспортных средствах, месте происшествия и т. д. Групповая принадлежность этих следов должна сопоставляться с групповой принадлежностью образцов крови погибшего.
Возможность определения различных групп эритроцитов, сыворотки и ферментов в крови живых людей, а также трупов, не подвергшихся резким гнилостным изменениям, значительно шире, чем в высохших следах крови. Это объясняется снижением активности большинства групповых антигенов крови при ее высыхании, разрушением групповых свойств под воздействием на пятно крови различных факторов внешней среды, а также неблагоприятным влиянием всевозможных загрязнений вещественных доказательств на реакции выявления групповых свойств в следах крови. В ряде случаев экспертные возможности групповой идентификации или дифференциации следов крови ограничены малым размером пятен крови. Между тем в большинстве случаев (за исключением экспертиз крови в делах о спорном отцовстве, материнстве и замене детей) при судебно-медицинском исследовании вещественных доказательств приходится сталкиваться именно со следами крови (пятнами, помарками, засохшими брызгами и т. д.).
Последовательность определения групповых антигенов в следах крови на вещественных доказательствах в основном зависит от групп крови проходящих по делу лиц. Поэтому эксперт вначале исследует набор групповых антигенов в образцах потерпевших, обвиняемых или подозреваемых. Эти образцы должны быть предоставлены эксперту следственными органами без изменения.
Выявление эритроцитарных групп в пятнах крови. Классическая система группы крови АВО имеет первостепенное значение для судебно-медицинского дифференцирования следов крови. Это связано с высоким полиморфизмом этой системы, с благоприятной частотой распространения групп среди население всего Земного шара и, главное, с исключительной устойчивостью антигенов данной системы крови к внешним воздействиям среды.
В пределах данной системы всех людей можно разделить на четыре основные группы: А (I), А (II), В (III) и АВ (IV).
Передающиеся по наследству различия антигена А, подразделяющие его на А1 (А «сильное») и А2 (А «слабое»), расширяют полиморфизм системы АВО до шести групп: 0 (I), А1 (II), А2 (II), В (III), А1В (IV) и А2В (IV). Подгруппы А1, А2, А1В и А2В увеличивают возможность судебно-медицинского дифференцирования следов крови.
Средняя частота встречаемости групп системы АВО (О — 35%, А1 - 30%, В - 20%, А1В - 8%. А2 - 5%, А2В - 2%) позволяет во многих экспертных случаях дифференцировать кровь одного человека от другого исследованием только одной этой системы. В зависимости от конкретных данных, имеющихся в распоряжении следственных органов, такое дифференцирование иногда бывает достаточным для выяснения многих обстоятельств преступления или происшествия.
Сейчас систему АВО принято называть системой АВО (Н). Это связано с тем, что в эритроцитах крови большинства людей с группами А (II), В (III) и АВ (IV) содержится сопутствующий антиген Н, близкий по природе к антигену О. Выявление такого антигена в пятнах и образцах крови проходящих по делу лиц прочно вошло в экспертную практику. Оно, во-первых, в какой-то мере расширяет возможность группового дифференцирования следов крови (например, потерпевший А (II) группы с сопутствующим антигеном Н, а подозреваемый А (II) группы без сопутствующего антигена Н) и, во-вторых, необходимо для оценки результатов определения групповой принадлежности крови и выделений в смешанных пятнах.
Определение групп крови системы АВО (Н) основано на выявлении соответствующих антигенов и агглютининов. Для судебно-медицинской диагностики группы крови в исследуемом пятне решающим является обнаружение того или иного антигена. Это вызвано тем, что агглютинины альфа и бета в крови разных лиц имеют различную силу выраженности, более подвержены воздействиям и сохраняются в пятне крови от нескольких дней до нескольких месяцев и даже лет. Антигены же А, В, О и Н при отсутствии гниения или бездействия каких-либо сильных разрушающих факторов (ультрафиолетовых лучей, высокой температуры и т. п.) сохраняются в пятне крови десятки, сотни и даже тысячи лет.
В настоящее время существуют три основных метода выявления антигенов системы АВО (Н) в пятнах крови, причем каждый имеет ряд модификаций, направленных на устранение всевозможных неблагоприятных воздействий на ход иммунологической реакции абсорбции, а также методы абсорбции-элюции смешанной агглютинации.
Количественный метод абсорбции агглютининов довольно прост, не требует высокоактивных диагностических реагентов, его модификации позволяют избежать влияния различных загрязнений предмета-носителя. Главный его недостаток — сравнительно малая чувствительность, вследствие чего он требует довольно значительного количества исследуемого пятна крови (30—50 мг сухой крови вместе с материалом предмета-носителя). При малых количествах крови его не всегда можно применить.
Серологические методы абсорбции-элюции в смешанной агглютинации в основном применяются для установления групповой принадлежности крови в следах малого размера. Достоинство их — исключительная чувствительность, позволяющая выявлять групповые антигены системы АВО в ниточке крови длиной не более 0,5—0,7 см. Эти методы значительно расширили возможности группового дифференцирования следов крови на вещественных доказательствах и сейчас взяты на вооружение всеми экспертными судебно-медицинскими учреждениями. Необходимо отметить, что для методов абсорбции-элюции, и особенно смешанной агглютинации, требуются диагностические сыворотки высокой активности. Кроме того, высокая чувствительность методов требует от эксперта большой осторожности и особой тщательности в соблюдении всех этапов исследования во избежание появления неспецифических реакций, которые могут привести к экспертным ошибкам.
Агглютинины альфа и бета так же, как и групповые антигены системы АВО (Н), имеют диагностическую ценность для судебно-медицинского исследования пятен крови. Выявление даже одного агглютинина в исследуемом пятне крови иногда позволяет исключить возможность происхождения крови от конкретного лица. Например, выявление в пятне крови только одного агглютипина альфа свидетельствует о том, что эта кровь не могла произойти от лиц с А (II) и АВ (IV) группами крови.
Существует еще целый ряд более редких систем, также имеющих экспертное значение.
Определение половой принадлежности крови. Решение этого вопроса часто имеет огромное значение для следствия, особенно в тех случаях, когда групповая характеристика крови лиц разного пола, проходящих по делу, совпадает. Известно, что у женщин имеются две одинаковые половые хромосомы (XX), а у мужчин — две разные (ХУ). Для мужской хромосомы У характерно специфическое свечение (люминесценция), возникающее при обработке мазка крови, а следовательно, и ядер ее клеточных элементов специальным красителем (флюорохромом). На этом свечении У-хромосомы, выявляемом люминесцентным микроскопированием мазков крови, и основан диагноз мужской крови.
Для установления половой принадлежности крови указанным выше методом требуется сравнительно большое количество крови (пятно крови размером 1,5х1,5 см и более). Данный метод позволяет проводить диагностику пола по пятнам значительной давности (более полугода).